Иммуносенсорные системы с флуоресцентной регистрацией на основе ленгмюровских пленок

Разработан метод определения белковых антигенов для флуоресцентного иммуноанализа с помощью модельной системы, сформированной на основе методики приготовления ленгмюровских пленок. В качестве маркеров для регистрации связывания антигена на поверхности ленгмюровских пленок антител были использованы флуоресцеинизотиоцианат и ранее не исследованные донорно-акцепторные пары маркеров с переносом энергии: Yb-комплекс тетра-фенилпорфирина–бензоилтрифторацетонизотиоцианат и производное тетра(карбоксифенил)порфирина–цианиновый краситель, содержащий пятичленную полиеновую цепь. Регистрацию проводили в ближнем ИК диапазоне (для первой пары) и в видимом диапазоне спектра (для второй пары). Для снижения неспецифической сорбции белка (антигена) был предложен метод создания неполярной поверхности при нанесении в качестве подложки четного числа слоев стеариновой кислоты в пленке Ленгмюра–Блоджетт. Достигнута высокая чувствительность модельных систем к белковому антигену в растворе – до 10^-11 М; при этом время, требуемое для анализа, составляло 6–8 мин. Модельная система с первой донорно-акцепторной парой была апробирована при анализе плазмы крови. Впервые исследована сенсибилизированная дикетонатными комплексами лантаноидов флуоресценция Dy³⁺-, Tm³⁺- и Yb³⁺-комплексов тетрафенилпорфирина и показана возможность усиления ИК флуоресценции этих комплексов в ленгмюровской пленке.