Сравнение возможностей лазерной сканирующей микроскопии и многофотонной томографии для визуализации кожи человека in vivo и свиной кожи ex vivo

В экспериментах на коже человека in vivo и свиной коже ex vivo проведено сравнение двух современных методов оптической микроскопии – конфокальной лазерной сканирующей микроскопии (в режиме флуоресценции и "на отражение") и многофотонной томографии (в режиме автофлуоресценции и генерации второй гармоники). Все слои кожи, а именно: роговой слой (РС), шиповатый слой (ШС), базальный слой (БС), сосочковый слой (СС) и ретикулярная дерма (РД), а также переходные зоны между этими слоями – исследовались неинвазивно с высоким разрешением с помощью вышеупомянутых методов микроскопии. В случае конфокальной лазерной сканирующей микроскопии (КЛСМ) для измерений в режиме флуоресценции использовался флуоресцентный краситель, нанесение которого на поверхность кожи хорошо подходит для изучения РС и характеризации барьерной функции кожи. Для исследований глубоко расположенных слоев кожи, таких как ШС, БС и СС, флуоресцентный краситель должен быть введен в кожу, что существенно ограничивает возможности изучения флуоресценции кожи с помощью КЛСМ. Результаты измерений методом КЛСМ в режиме "на отражение" можно сравнивать с результатами, полученными методом многофотонной томографии (МФТ) для всех слоев кожи, за исключением РД. В РД кожи КЛСМ не позволяет отличить коллаген от эластина и измеряет их суперпозицию. Используя МФТ, можно анализировать структуры коллагена и эластина по отдельности, что важно для исследования процессов старения кожи. Пространственное разрешение МФТ выше, чем у КЛСМ. На примере кожи человека и свиной кожи обсуждаются преимущества и ограничения обоих методов, с акцентом на различия и сходство между ними.