Преимущества и возможности флуоресцентных методов для визуализации апоптоза и аутофагии в опухолевых клетках человека in vitro

Исследованы возможности применения флуоресцентных методов исследования и их преимущества для визуализации и определения вида запрограммированной клеточной гибели опухолевых клеток человека под действием флавоноидов в экспериментах in vitro. Объектом исследования служили опухолевые клетки рака шейки матки HeLa и карциномы почки A498, для тестирования в экспериментах использовали флавоноидсодержащий экстракт аврана лекарственного (Gratiolaofficinalis L.). Использовали следующие флуоресцентные методы: тест “живые и мертвые” с двойным окрашиванием – йодистым пропидием и акридиновым оранжевым, метод двойного окрашивания аннексином и йодистым пропидием. Подтверждение индукции аутофагии проводили с помощью клеточного анализатора Muse с флуоресцентными реагентами MuseAutophagy LC3-Antibody BasedKit. Применение флуоресцентных способов окраски с использованием двойного окрашивания акридиновым оранжевым и йодистым пропидием в тесте “живые и мертвые” по сравнению с фазовой микроскопией дает возможность визуализировать процессы образования апоптотических телец и аутофагосом в клетках и, следовательно, может служить одним из методов скрининговой оценки эффективности различных химиопрепаратов.