|
Биофизика и медицинская физика
Детектирование конформационных изменений альбумина при его гликировании и термической денатурации методами флуоресцентной спектроскопии и малоуглового рентгеновского рассеяния
Н. Р. Ровнягинаa, Т. Н. Тихоноваa, Д. С. Молоденскийb, Е. А. Ширшинa a Московский государственный университет имени М. В. Ломоносова
b Национальный исследовательский центр «Курчатовский институт»
Аннотация:
Объект исследования. Растворы бычьего сывороточного альбумина (БСА) и его агрегаты. Цель работы. Исследование структурных изменений молекул альбумина с помощью оптических и рентгеновских методик при их гликировании и термической денатурации, во время которых белок проходит через схожие интермедиаты. Исследование проведено для раствора БСА при рН 3 и рН 7.4. Использованные методы и подходы. Метод стационарной и время-разрешенной флуоресцентной спектроскопии, а также метод малоуглового рентгеновского рассеяния (МУРР). Основные результаты. Показано, что положение максимума и время затухания триптофановой флуоресценции чувствительны к конформационным перестройкам белка при инкубации при 65$^{\circ}$C при pH 7.4. Обнаружено, что при гликировании значительным образом растет доступность гидрофобных сайтов связывания зонда Нильский красный. В результате термической денатурации БСА при pH 3 изменений вышеуказанных параметров не наблюдалось, однако методом МУРР для данной системы была обнаружена агрегация белка уже при температуре 25$^{\circ}$C. Дальнейшая инкубация образца при температуре 65$^{\circ}$C не приводит к изменению параметров окружения триптофановых остатков в белке и появлению/увеличению доступности гидрофобных сайтов связывания. Показано, что, несмотря на схожие промежуточные состояния, которые проходят рассматриваемые системы, структурные перестройки белка различны для гликированного и термически денатурированного/агрегированного альбумина.
Ключевые слова:
гликирование, альбумин, термическая денатурация, конформация, расплавленная глобула, флуоресцентный зонд Нильский красный, тиофлавин Т, конечные продукты гликирования, $\pi$-stаскing, фибриллы, патологические состояния, социально значимые заболевания, флуоресцентная спектроскопия, малоугловое рентгеновское рассеяние, социально значимые заболевания, флуоресцентная спектроскопия, малоугловое рентгеновское рассеяние.
Образец цитирования:
Н. Р. Ровнягина, Т. Н. Тихонова, Д. С. Молоденский, Е. А. Ширшин, “Детектирование конформационных изменений альбумина при его гликировании и термической денатурации методами флуоресцентной спектроскопии и малоуглового рентгеновского рассеяния”, Изв. Сарат. ун-та. Нов. cер. Сер. Физика, 17:3 (2017), 179–190
Образцы ссылок на эту страницу:
https://www.mathnet.ru/rus/isuph295 https://www.mathnet.ru/rus/isuph/v17/i3/p179
|
Статистика просмотров: |
Страница аннотации: | 44 | PDF полного текста: | 11 | Список литературы: | 22 |
|